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細胞培養(yǎng)中的鐵和亞鐵

更新時間:2019-05-27  |  點擊率:2051

鐵,在細胞培養(yǎng)中非常重要。即使在生物制藥、組織工程等領(lǐng)域所用的無血清培養(yǎng)基中,鐵也是一種重要的補充劑。

 

但它是一把雙刃劍,同時具有有益和有毒的特性。因此,對鐵的調(diào)控非常重要。在生理狀態(tài)下,在使用血清時,血清中有轉(zhuǎn)鐵蛋白,它可介導(dǎo)鐵從培養(yǎng)基中輸運到細胞內(nèi)。而使用無血清、不含動物蛋白的培養(yǎng)基,則極大地增加了培養(yǎng)中鐵毒性的可能性。這在生物制藥和組織工程中尤為關(guān)鍵,其中鐵介導(dǎo)的氧化和羰基應(yīng)激可以改變細胞培養(yǎng)產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)。

 

一些人工合成培養(yǎng)基中含有硝酸鐵或硫酸亞鐵,有些培養(yǎng)基則采取了螯合鐵。而采用新生牛血清或胎牛血清,血清中的結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬結(jié)合,起到解毒作用,例如轉(zhuǎn)鐵蛋白能結(jié)合鐵離子,進行細胞外基質(zhì)中鐵離子濃度的調(diào)控。

 

鐵對細胞呼吸和代謝至關(guān)重要。沒有鐵,細胞就會停止生長并終死亡。鐵可以進行單價的氧化還原反應(yīng)。其氧化和還原形式分別稱為鐵和亞鐵。鐵在細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的主要功能如下:

 

血紅蛋白是哺乳動物中富含血紅素的蛋白,其主要功能是結(jié)合、運輸和釋放分子氧。在氧結(jié)合,運輸和釋放期間,血紅蛋白結(jié)合的鐵保持在亞鐵狀態(tài)。當(dāng)血紅蛋白結(jié)合鐵被氧化成三價鐵時,它不能輸送氧氣。氧化血紅蛋白被稱為高鐵血紅蛋白。

 

細胞色素是一組含有血紅素的蛋白質(zhì),位于線粒體中。它們的功能是沿著呼吸鏈順序轉(zhuǎn)移電子,導(dǎo)致氧氣還原成水,并以ATP的形式儲存能量。通過細胞色素轉(zhuǎn)移電子涉及鐵的氧化和還原循環(huán)。

 

鐵以非血紅素形式存在,作為琥珀酸脫氫酶的一部分,琥珀酸脫氫酶是一種催化富馬酸鹽形成的酶。

 

作為一種酶輔助因子,鐵可以保護細胞免受氧化損傷。它作為過氧化氫酶和過氧化物酶等酶的血紅素成分存在,催化過氧化物向水的轉(zhuǎn)化。

 

在生理溶液中同時存在亞鐵和三價鐵,它經(jīng)常作為硝酸鹽或硫酸鹽添加到細胞培養(yǎng)基中,并經(jīng)歷氧化反應(yīng)。鐵對培養(yǎng)基中氧還電位的敏感性取決于絡(luò)合分子。鐵的絡(luò)合分子包括氨基酸,核苷酸,生理螯合劑和蛋白質(zhì)。

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Ausbian精制新生牛血清(γ照射)產(chǎn)自澳洲,血源來自新西蘭,經(jīng)過0.22微米過濾和15kGy的gamma射線照射,避免了存在微生物的風(fēng)險。新生牛血清中富含可能組織細胞所需的發(fā)育因子、血漿蛋白等,保證營養(yǎng)和解毒功能。

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