梅斯納小體（Meissner corpuscle, 也稱為觸覺小體）是密集分布在哺乳動(dòng)物無毛皮膚上的機(jī)械感覺末梢器官。梅斯納小體的基本解剖結(jié)構(gòu)和支配它的Aβ（較大的胞體直徑和快速動(dòng)作電位傳導(dǎo)）機(jī)械感覺神經(jīng)元已被廣泛描述。然而，人們對(duì)梅斯納小體以及支配它的Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元在觸覺相關(guān)行為、感覺運(yùn)動(dòng)能力和觸覺感知方面的要求卻知之甚少。

缺乏腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）或其受體TrkB的小鼠具有一系列發(fā)育障礙，包括缺乏梅斯納小體。來自美國哈佛醫(yī)學(xué)院和斯坦福大學(xué)的研究人員推斷，將TrkB操縱限制在感覺神經(jīng)元與選擇性遺傳標(biāo)記方法相結(jié)合，將允許他們研究梅斯納小體的發(fā)育組裝及其在軀體感覺中的功能。在研究梅斯納小體發(fā)育時(shí)，他們發(fā)現(xiàn)有兩種類型的Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元支配梅斯納小體。他們?cè)u(píng)估了梅斯納小體對(duì)觸覺敏感度和精細(xì)感覺運(yùn)動(dòng)控制的要求，以及支配該機(jī)械感覺末端器官的兩種Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元的解剖學(xué)、生理學(xué)和超微結(jié)構(gòu)特性。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在2020年6月19日的Science期刊上，論文標(biāo)題為“Meissner corpuscles and their spatially intermingled afferents underlie gentle touch perception”。

 

感覺神經(jīng)元特異性敲除TrkB導(dǎo)致梅斯納小體*喪失，而不影響小鼠無毛皮膚的其他機(jī)械感覺末端器官，包括Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元-梅克爾細(xì)胞復(fù)合物和帕西尼小體（Paciniancorpuscle，也稱為環(huán)層小體）。行為測(cè)量表明，缺乏梅斯納小體的小鼠在感知、對(duì)作用于無毛皮膚的輕微的可檢測(cè)力作出的反應(yīng)和精細(xì)的感覺運(yùn)動(dòng)控制方面存在缺陷。

遺傳標(biāo)記實(shí)驗(yàn)顯示，梅斯納小體由兩種類型分子上不同的Aβ感覺神經(jīng)元支配：一種表達(dá)TrkB，另一種表達(dá)酪氨酸激酶Ret。盡管支配著同一個(gè)末端器官，但是這兩種Aβ神經(jīng)元類型對(duì)觸覺刺激的反應(yīng)是不同的：TrkB陽性（TrkB+）的梅斯納小體傳入更敏感，在無毛皮膚的梯形壓痕的起始和偏移時(shí)都作出反應(yīng)，而Ret+梅斯納小體傳入則不太敏感，很少在梯形壓痕偏移時(shí)作出反應(yīng)。一些Ret+神經(jīng)元甚至在靜態(tài)壓痕刺激時(shí)有持續(xù)反應(yīng)。此外，這兩種Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元類型的軸突末端被發(fā)現(xiàn)是同型平鋪，但異型偏移。計(jì)算建模表明，這種解剖學(xué)安排大限度地提高了編碼敏銳度的可用信息，同時(shí)確保使用有限數(shù)量的神經(jīng)元*覆蓋皮膚。后，使用電子顯微鏡的超微結(jié)構(gòu)分析顯示，更敏感的TrkB+梅斯納小體傳入的軸突末梢比不太敏感的Ret+梅斯納小體傳入的軸突末梢具有更多數(shù)量的片狀細(xì)胞包裹。

這些研究人員作出的結(jié)論是，兩種同型平鋪但異型偏移的Aβ機(jī)械感覺神經(jīng)元具有不同的分子、生理和超微結(jié)構(gòu)特性，都支配著梅斯納小體，而梅斯納小體是感知作用于無毛皮膚的輕微的可檢測(cè)力并作出行為反應(yīng)的基礎(chǔ)。

在細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%～20%（常見為10%）的。具體到不同試驗(yàn)，應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定濃度。

胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存，運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融，確保血清中因子活性不受影響，保證血清優(yōu)良品質(zhì)。

 

關(guān)于胎牛血清的融化方法：因?yàn)檠逶谌诨^程中，瓶子里冰塊的底部你會(huì)看見亮亮的蛋白絲在下沉，如同蜂蜜溶于水時(shí)的亮線，這就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔點(diǎn)高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下高級(jí)冰淇淋和大棒冰的區(qū)別，你懂得?。┰囅?，如果采用4℃過夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大約需要10小時(shí)左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此時(shí)就很容易有一些蛋白飽和析出，（大多是脂蛋白和纖連蛋白），這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。

采用三步法，只要2.5個(gè)小時(shí)，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間，而且大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。