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『Venor®GeM qEP』助力抗腫瘤藥物研發(fā)取得新進(jìn)展

更新時間:2023-08-08  |  點擊率:635

美國食品和藥物管理局(FDA)規(guī)定,用于細(xì)胞治療的產(chǎn)品,需要通過支原體檢測,來保障產(chǎn)品在使用過程中的無菌性和安全性。

在細(xì)胞培養(yǎng)實驗中,支原體污染的風(fēng)險較高。以目前版本的各國藥典中記載,28天培養(yǎng)法是“金標(biāo)準(zhǔn)",但對于應(yīng)用于臨床的生物制品來說,這種方法并不符合實際的需求。速度更快、靈敏度更高和特異性更強的NAT法,經(jīng)過方法學(xué)驗證,也可替代藥典中的傳統(tǒng)方法。

一項“FGFR抑制劑的臨床開發(fā)"的科學(xué)研究中,研究人員使用德國MB公司的Venor®GeM qEP支原體檢測試劑盒,對其使用的細(xì)胞系進(jìn)行支原體風(fēng)險評估。

研究背景

成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR)受體酪氨酸激酶(RTK)家族包含四個成員- FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4。FGFR在細(xì)胞增殖、遷移、血管生成和存活中起著關(guān)鍵作用。FGF/FGFR信號通路失調(diào)可導(dǎo)致不同腫瘤類型的形成,包括膀胱癌、胃癌、子宮內(nèi)膜癌和肺癌。因此,靶向FGFR為FGFR依賴性腫瘤患者的抗癌治療提供了一個有吸引力的策略。

研究人員發(fā)現(xiàn)了了CPL304110,一種有效的、選擇性的小分子,作為FGFR 1/2/3抑制劑,可以用作FGFR畸變癌癥的潛在藥物。

研究結(jié)果

首先,測試了對FGFR激酶的潛在抑制作用?;衔顲PL304110對FGFR2、FGFR1 和FGFR3活性的抑制相對更強。在接下來的實驗中,研究人員分析了CPL304110對7種激酶的選擇性,這些激酶與FGFR受體(VEGFR2、PDGFRβ)具有更高的結(jié)構(gòu)同源性,或在腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中發(fā)揮重要作用(AURKA、FLT3、IGF1R、JAK2、TRKA)。TRKA激酶和KDR的抑制值顯著。

最后,研究人員對CPL304110進(jìn)行了針對468個激酶的廣泛體外篩選。

在該研究中,研究結(jié)果表明,CPL304110是一種有效的FGFR1、FGFR2、FGF3抑制劑,同時對CSF1R、FLT3(D835V)、KIT(A829P)、RET、RIPK1、TRKA、TYK2、KIT(V559D)RET(M918T)也有很強的抑制活性。額外的抑制作用可能不僅是有益的,而且還表明CPL304110是治療具有特定突變的癌癥患者的有希望的藥物。

CPL304110的抗增殖活性在一組不同來源和FGFR依賴性的人腫瘤細(xì)胞系中被確定。在正常的非腫瘤細(xì)胞系HUVEC上驗證了CPL304110對細(xì)胞增殖的影響,以確定其潛在的安全閾值。用CPL304110處理的細(xì)胞顯示FGFR介導(dǎo)的信號激活顯著降低。

在體內(nèi),口服CPL304110在所有被測試的異種移植模型中都具有很強的抗腫瘤功效。

相關(guān)實驗

對不同癌細(xì)胞和對照細(xì)胞系進(jìn)行了化合物細(xì)胞毒性評估。在研究中使用了兩種類型的細(xì)胞系:

  • 與已確認(rèn)的FGFR基因異常相關(guān)的FGFR依賴性細(xì)胞系

  • FGFR非依賴性細(xì)胞系。

研究人員還使用正常細(xì)胞系HUVEC作為對照。所有細(xì)胞系均按照生產(chǎn)廠家的說明進(jìn)行培養(yǎng),并通過Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒(Minerva Biolabs的qPCR產(chǎn)品)進(jìn)行了支原體檢測,并確認(rèn)為陰性。


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